Nyckeldifferens - Flödescytometri vs FACS

Inom ramen för cellteori är celler den grundläggande strukturella och funktionella enheten för alla levande organismer. Cellsortering är en metod som används för att separera olika celler beroende på de fysiologiska och morfologiska egenskaperna. De kan ha intracellulära eller extracellulära egenskaper. Interaktion mellan DNA, RNA och proteiner betraktas som intracellulära interaktiva egenskaper medan formen, storleken och olika ytproteiner betraktas som extracellulära egenskaper. Inom dagens vetenskap har cellsorteringsmetoder lett till att hjälpa olika undersökningar i biologiska studier och även i upprättandet av nya principer genom forskning om medicin. Cell sortering utförs på olika metoder som inkluderar både primitiv med mindre utrustning och avancerade teknologiska metoder med användning av sofistikerade maskiner. Flödescytometri, fluorescerande aktiverad cellsortering (FACS), magnetisk cellval och sortering av enstaka celler är de viktigaste metoderna som används. Flödescytometri och FACS utvecklas för att differentiera celler beroende på deras optiska egenskaper. FACS är en specialiserad typ av flödescytometri. Flödescytometri är en metodik som används under analys av en heterogen cellpopulation enligt olika cellytmolekyler, storlek och volym som möjliggör undersökning av enstaka celler. FACS är en process genom vilken en provblandning av celler sorteras efter deras ljusspridning och fluorescenskarakteristik i två eller flera behållare. Detta är den viktigaste skillnaden mellan flödescytometri och FACS.

INNEHÅLL

1. Översikt och nyckelskillnad 2. Vad är flödescytometri 3. Vad är FACS 4. Likheter mellan flödescytometri och FACS 5. Jämförelse vid sida - Flödescytometri mot FACS i tabellform 6. Sammanfattning

Vad är flödescytometri?

Flödescytometri är en metod som används för att undersöka och bestämma uttrycket av intracellulära molekyler och cellytan och för att definiera och karakterisera distinkta celltyper. Det används också för att bestämma cellvolym och cellstorlek och för att utvärdera renheten för subpopulationer som isoleras. Detta möjliggör utvärdering av flera parametrar av enstaka celler ungefär samtidigt. Flödescytometri används för att mäta intensiteten av fluorescens som produceras på grund av fluorescerande märkta antikroppar som hjälper till att identifiera proteiner eller ligander som binder till tillhörande celler.

Generellt innehåller flödescytometri huvudsakligen tre undersystem. Det är fluidik, elektronik och optik. Vid flödescytometri finns fem huvudkomponenter tillgängliga som används vid cellsortering. De är en flödescell (en ström av vätska som används för att transportera dem och anpassa cellerna för optisk avkänningsprocess), ett mätsystem (kan vara av olika system inklusive kvicksilver- och xenonlampor, vattenkylt med hög effekt eller luftkylda lasrar eller diodlasrar med låg effekt), en ADC; Analogt till digitalt omvandlingssystem, amplifieringssystem och en dator för analys. Förvärvet är den process genom vilken data samlas in från proverna med hjälp av flödescytometer. Denna process förmedlas av en dator som är ansluten till flödescytometern. Programvaran som finns i datorn analyserar informationen som matas till datorn från flödescytometern. Programvaran har också förmågan att justera parametrar för experimentet som styr flödescytometern.

Vad är FACS?

I samband med flödescytometri är fluorescensaktiverad cellsortering (FACS) en metod som används vid differentiering och sortering av ett prov av en blandning av biologiska celler. Cellerna separeras från två eller flera behållare. Sorteringsmetoden är baserad på de fysiska egenskaperna hos cellen som inkluderar ljusspridning och fluorescensegenskaper hos cellen. Detta är en viktig vetenskaplig teknik som kan användas för att få tillförlitliga kvantitativa och kvalitativa resultat av fluorescenssignaler som släpps ut från varje cell. Under FACS, initialt, den förut erhållna blandningen av celler; en suspension riktas mot mitten av en smal vätskeström som flyter snabbt. Vätskeflödet är utformat för att separera cellerna i suspensionen baserat på diametern för varje cell. En vibrationsmekanism appliceras på suspensionströmmen som resulterar i bildandet av enskilda droppar.

Systemet är kalibrerat för att skapa en enda droppe med en cell. Strax före bildandet av droppar rör sig flödesupphängningen längs en fluorescensmätningsapparat som detekterar fluorescenskarakteristiken för varje cell. Vid bildningen av droppar placeras en elektrisk laddningsring som en laddning induceras till ringen före mätningen av fluorescensintensiteten. När väl dropparna har bildats från upphängningsströmmen fångas en laddning in i dropparna som sedan går in i ett elektrostatisk avböjningssystem. Enligt laddningen leder systemet dropparna till olika behållare. Metoden för applicering av laddningen varierar beroende på olika system som används i FACS. Utrustningen som används i FACS är känd som en fluorescensaktiverad cellsorterare.

Vad är likheten mellan flödescytometri och FACS?

  • Flödescytometri och FACS utvecklas för att differentiera celler beroende på deras optiska egenskaper.

Vad är skillnaden mellan flödescytometri och FACS?

Flödescytometri vs FACS
Flödescytometri är en metodik som används under analys av en heterogen cellpopulation enligt olika cellytmolekyler, storlek och volym som möjliggör undersökning av enstaka celler.FACS är en process genom vilken en provblandning av celler sorteras efter deras ljusspridning och fluorescenskarakteristik i två eller flera behållare.

Sammanfattning - Flödescytometri vs FACS

Cellen är den grundläggande strukturella och funktionella enheten för alla levande organismer. Cellsortering är processen genom vilken celler isoleras och differentieras i olika kategorier baserat på deras intracellulära och extracellulära egenskaper. Flödescytometri och FACS är två viktiga metoder för cellsortering. Båda processerna utvecklas för att differentiera celler beroende på deras optiska egenskaper. Flödescytometri är en metodik som används under analys av en heterogen cellpopulation enligt olika cellytmolekyler, storlek och volym som möjliggör undersökning av enstaka celler. FACS är en process genom vilken en provblandning av celler sorteras efter deras ljusspridning och fluorescensegenskaper i två eller flera behållare. Detta är skillnaden mellan Flowcytometri och FACS.

Ladda ner PDF-versionen av Flow Cytometry vs FACS

Du kan ladda ner PDF-version av den här artikeln och använda den för offline-ändamål enligt citatnot. Ladda ner PDF-versionen här Skillnaden mellan flödescytometri och FACS

Referens:

  1. Flowcytometri (FCM) / FACS | Fluorescensaktiverad cellsortering (FACS). Åtkom 22 september 2017. Finns här Ibrahim, Sherrif F. och Ger van den Engh. "Flödescytometri och cellsortering." SpringerLink, Springer, Berlin, Heidelberg, 1 januari 1970.. Åtkom 22 september 2017. Finns här

Bild med tillstånd:

  1. 'Cytometer'By Kierano - Eget arbete, (CC BY 3.0) via Commons Wikimedia Fluorescensassisterad cellsortering (FACS) B'By SariSabban - Sabban, Sari (2011) Utveckling av ett in vitro-modellsystem för att studera interaktionen mellan Equus caballus IgE med sin högaffinitet FcεRI-receptor (doktorsavhandling), University of Sheffield, (CC BY-SA 3.0) via Commons Wikimedia